发明专利
基本信息 | |
标题 | 一种制备用于检测猪瘟病毒血清抗体的可溶性E2抗原的方法 |
申请日 | 2008-07-06 00:00:00.0 |
申请专利权人 | 188bet平台app官方 兰州兽医研究所 |
发明设计人 | 刘湘涛;尹双辉;孙世琪;田宏;尚佑军;韩雪清;刘艳红 |
摘要 | 一种制备用于检测猪瘟病毒血清抗体的可溶性E2抗原的方法,包括下述步骤:A.克隆E2基因抗原结构域部分;B.构建重组表达载体;C.在LB培养基中表达,获得可溶性的重组E2蛋白;D.亲和层析纯化重组E2蛋白;E.pGST-E2表达蛋白的鉴定,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定表达的重组E2蛋白;F.利用重组E2蛋白建立检测猪瘟血清抗体间接ELISA方法。本发明改良了传统的LB培养基,促进可溶性的E2蛋白表达;解决了猪瘟病毒E2抗原在大肠杆菌中主要以包涵体表达的难题,获得的可溶性E2蛋白与完整猪瘟病毒粒子具有相似的免疫学效果,可作为替代猪瘟病毒粒子的抗原,建立敏感性、特异、安全和可靠的猪瘟病毒血清抗体的检测间接ELISA方法。 |