发明专利
| 基本信息 | |
| 标题 | 一种猪瘟重组亚单位疫苗的制备方法 |
| 申请日 | 2008-07-06 00:00:00.0 |
| 申请专利权人 | 188bet平台app官方 兰州兽医研究所 |
| 发明设计人 | 刘湘涛;尹双辉;孙世琪;田宏;尚佑军;韩雪清;刘艳红 |
| 摘要 | 一种猪瘟重组亚单位疫苗的制备方法，包括下述步骤：A.利用逆转录－聚合酶链式反应方法克隆猪瘟疫苗株E2蛋白的编码基因；B.构建融合E2基因：C.构建重组表达载体rE2；D.rE2的诱导表达：E.rE2纯化。F.Western blotting方法检测rE2活性。本发明创造性地以双E2基因串联表达方式使E2抗原表位的数量增加一倍，显著提高了重组E2亚单位疫苗的免疫效果；为提高双E2蛋白表达效率，在第二个E2基因 5′端起始密码子(ATG)上游增加一个大肠杆菌RBS序列(5′－AAGGAG－3′)；同时在串联的E2基因之间增加氨基酸接头5′－GSA GSAAGS GEF－3′，使获得的E2蛋白能够完整展示其抗原表位。本发明的E2蛋白重组亚单位疫苗，免疫保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗相当。 |