发明专利
基本信息 | |
标题 | 甘蓝型油菜BnPABP8启动子及制备方法和应用 |
申请日 | 2011-05-27 00:00:00.0 |
申请专利权人 | 188bet平台app官方 油料作物研究所 |
发明设计人 | 刘胜毅;石磊;董彩华 |
摘要 | 本发明公开了一种甘蓝型油菜BnPABP8启动子及制备方法和应用,步骤:A、引物设计:根据已知序列设计特异性步移引物。B、油菜启动子制备:利用SDS裂解法提取油菜DNA,根据基因组步移试剂盒,进行基因组步移,取5μlDNA用DraⅠ酶切,检测DNA纯度,用四种试剂盒提供的内切酶进行DNA的酶切,并纯化酶切产物,纯化步骤:向酶切液中加入乙醇,沉淀,离心,晾干,用无菌水溶解,纯化完成后加入特异性接头,第一轮PCR反应以GSP1和AP1为引物;第二轮PCR以第一轮PCR反应产物稀释液为模板,以GSP2和AP2为引物扩增,回收纯化第二轮PCR产物,与T载体连接,获得PBnPABP8。PBnPABP8在植物根部、茎部、叶片、花蕾以及花药中的应用。在油菜食用油安全性和利用转基因提高作物抗病,抗逆性,抗倒伏。 |