| 摘要 |
本发明公开了一种转基因油菜Oxy－235事件外源插入载体右边界旁侧序列及其应用，涉及生物工程技术领域中转基因油菜的检测。本发明以转基因油菜品种Oxy－235为材料，利用Invitrogen公司GenomeWalker试剂盒构建基因组文库，并利用引物：OXYRB－1：5’ACTCGCTCGATCCCACGGGCCACTAT 3’和OXYRB－2：5’GCAACGGCAGCCTGCGGTGTCAGAAGT 3’与试剂盒提供的接头引物进行PCR扩增，获得Oxy－235事件外源插入载体右边界旁侧序列，序列为SEQ NO.1。其中第1－777位碱基与插入载体序列相同，第778－1109位碱基与插入载体无同源性，为油菜基因组序列。根据插入载体序列和油菜基因组序列的接合序列，设计了引物OXYRG：5’GATAGATGGTGGTGTGAGTCTTGT 3’和OXYRV：5’CCTAACTTTTGGTGTGATGATGCT 3’以及TaqMan探针OXYRP：5’FAM－TGCCATCAGCTGACACGCCGTGC－TAMRA 3’，建立了转基因油菜外源基因整合事件Oxy－235的事件特异性定性、定量检测方法。本发明用于建立转基因油菜Oxy－235的其他事件特异性PCR检测方法研究。 |
