发明专利
基本信息 | |
标题 | 一种生产大片吸虫组织蛋白酶L1的方法 |
申请日 | 2007-04-25 00:00:00.0 |
申请专利权人 | 188bet平台app官方 上海兽医研究所 |
发明设计人 | 何国声;郭敏;徐梅倩;高兴春;曹杰;朱顺海;黄燕;赵其平;李家诚;庞程;米荣升 |
摘要 | 本发明公开了一种生产大片吸虫组织蛋白酶L1的方法,包括一个用PCR从大片吸虫成虫cDNA文库中扩增出大片吸虫组织蛋白酶L1基因的过程,一个构建含有组织蛋白酶L1全长基因的重组质粒的过程,一个将重组质粒转化入大肠杆菌中进行增殖的过程,一个诱导表达含有正确的重组质粒转化的大肠杆菌的过程,然后收集菌液,透析、过滤,最后将样品加入预先用水洗缓冲液处理好的蛋白纯化柱中,用水洗缓冲液冲洗,用洗脱缓冲液洗脱蛋白,得到大片吸虫组织蛋白酶L1蛋白。本发明的方法是一种低廉且产量高的表达组织蛋白酶L1的方法。本发明中组织蛋白酶L1在大肠杆菌中的表达量可达700mg/L,且易于纯化,便于投入实践应用中。 |