发明专利
| 基本信息 | |
| 标题 | 双表达的AAV重组病毒的制备方法 |
| 申请日 | 2012年11月09日 |
| 申请专利权人 | 188bet平台app官方 兰州兽医研究所 |
| 发明设计人 | 柳纪省;杨彬;兰喜;邱燕;殷相平;李学瑞;李宝玉;白银梅;张韵;李志勇;方玉萍 |
| 摘要 | 本发明公开了一种双表达的AAV重组病毒的制备方法，采用基因克隆技术将合成的特异性PRRSV?RNA干扰寡核苷酸序列克隆至AAV?Helper?Free?System中的表达质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP的U6启动子下游，将PRRSV的ORF5-6结构蛋白基因克隆至pAAV-U6-IRES-hrGFP的CMV启动子的下游，构建成双效腺相关病毒载体pAAV-U6-IRES-hrGFP-siRNA-ORF5-6，通过酶切及PCR鉴定后进行DNA测序以鉴定重组质粒。实验证实，双效质粒转染靶细胞Marc145，有延迟细胞病变的作用，说明双表达AAV疫苗载体能够转录出siRNA，对病毒的转录复制有一定的抑制效果。 |
| 授权公告号 | CN102925485B |