发明专利
基本信息 | |
标题 | 一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法 |
申请日 | 2013年11月27日 |
申请专利权人 | 188bet平台app官方 农业质量标准与检测技术研究所 |
发明设计人 | 陈爱亮;吴英;蒋小玲;吕珍珍;刘金钏;杨曙明 |
摘要 | 本发明公开了一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法。该方法包括如下步骤:1)富集待测食品中的细菌,将富集物与与DNA结合物共同孵育,获得PCR扩增模板;所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜,但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质;2)配制PCR反应体系,进行数字PCR反应;所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、细菌通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶;3)根据反应产生的荧光信号,计算所述待测液体食品中的菌落总数。本方法无需对食品中细菌进行分离培养,检测时间缩短至2-3小时;同时大大减少了背景DNA和基质的干扰,灵敏度低至1个拷贝;而且该方法无需设置标准曲线,根据结果可直接判读样品中的菌落总数,大大简化了操作步骤。 |
授权公告号 | CN103667462B |